Il-proteini jwettqu reazzjonijiet bijokimiċi kumplessi u għandhom ikollhom struttura spazjali tridimensjonali speċjali meta jwettqu funzjonijiet mikrobjali . Wara l-ġenerazzjoni mikrobjali, il-proteini nfushom jgħaddu wkoll minn proċessi fiżjoloġiċi kumplessi ta 'l-ewwel . f'esperimenti bijokimiċi, ħafna drabi huwa meħtieġ biex iwettqu riċerka xjentifika fuq id-denatura tal-proteina {{{{ Hydrochloride u urea huma r-reaġenti sperimentali l-aktar użati fid-denaturazzjoni tal-proteina . Allura, x'inhuma d-differenzi bejn it-tnejn? Kif tagħżel fl-esperiment?
Minħabba l-effikaċja ta 'fatturi esterni, il-konformazzjoni ta' molekuli ta 'proteina naturali puri tgħaddi minn bidliet anormali, li jirriżultaw fit-telf ta' attività bijoloġika u bidliet anormali fil-proprjetajiet fiżiċi u kimiċi tagħhom {. Dan it-tip ta 'sitwazzjoni tissejjaħ denaturazzjoni tal-proteina .}} Transduzzjoni tista' tinvolvi l-bonds sekondarji Bonds tal-peptidi fuq l-istruttura primarja .
Guanidine hydrochloride u proteini transġeneru tal-urea fihom żewġ sistemi: l-ewwel sistema hija l-fużjoni preferenzjali ta 'proteini transġeneru b'guanidine hydrochloride u urea, li tipproduċi nitric ossidu synthase . meta titneħħa Aġent . Il-proteina f'kundizzjonijiet naturali puri tkompli tinbidel f'intażi ta 'ossidu nitriku, li fl-aħħar iwassal għal proteina kompluta transġeneru; It-tieni sistema hija l-effett ta 'solubilizzazzjoni ta' guanidine hydrochloride u urea fuq residwi ta 'aċidu amminiku idrofobiku . minħabba l-abilità ta' guanidine hydrochloride u urea li jiffurmaw bonds kovalenti, il-bonds kovalenti ta 'guanidine hydrochloride u urea jeħtieġ mol / l) soluzzjonijiet . Bħala riżultat, guanidine hydrochloride u urea jsiru solventi organiċi tajbin għal residwi mhux polari, li jikkawżaw ir-residwi idrofobiċi ġewwa l-istruttura molekulari tal-proteina biex iwaqqfu u jżidu s-solubilità, li jwasslu għal livelli differenti ta 'denaturazzjoni tal-proteina .
Id-differenza bejn it-tnejn fil-konverżjoni tal-proteina:
Valur ta 'konċentrazzjoni: f'temperatura ta' ġewwa, 3-2 mol / l guanidine hydrochloride jistgħu jikkawżaw proteini sferiċi li jinbidlu mill-istat naturali tagħhom għaċ-ċentru ta 'l-istat ta' trasformazzjoni tagħhom . ġeneralment, li żżid il-valur ta 'konċentrazzjoni ta' l-aġent li enaturat jista 'jtejjeb il-livell ta' trasformazzjoni, u madwar 6mol / L guanidine hydrochlore L-istat . guanidine hydrochloride għandu abilità ta 'denaturazzjoni aktar b'saħħitha minn urea minħabba l-proprjetajiet katjoniċi tiegħu . Xi proteini sferiċi ma jistgħux jiġu trasformati kompletament anke f'soluzzjoni ta' 8 mol / l urea, mhux konxji li ġeneralment jeżistu f'konfformat (kompletament trasformat) fi 8 mol / l-guanidine Soluzzjoni .
Solubilità: Is-solubilità ta 'l-urea hija aktar baxxa u aktar dgħajfa minn dik ta' guanidine hydrochloride, b'solubilità ta '70% ~ 90% . meta l-urea għandha ħin ta' effikaċja itwal jew temperatura ogħla, hija xquq biex tipproduċi cyanate, li jżejjen il-gruppi hydroxyl ta 'l-assi ta' proteini rikombinanti vantaġġi li ma jkunux dgħajfa fl-elettroliti, in-newtralizzazzjoni, u bi prezz baxx; Guanidine hydrochloride għandu solubilità ta 'aktar minn 95% u effett ta' tidwib mgħaġġel mingħajr ma jikkawża dekorazzjoni ta 'bond kovalenti ta' proteini rikombinanti tal-assi . Madankollu, għandu żvantaġġi bħal spiża ogħla meta mqabbel ma 'l-urea, issetilja faċli taħt l-istandards aċidużi u alkalini, u l-impatt potenzjali fuq l-esperimenti ta' wara l-HOC.}}}}}}}}}
B'mod ġenerali, hekk kif ir-reaġenti sperimentali komuni fil-proċessi ta 'denaturazzjoni tal-proteini, il-vantaġġi u l-iżvantaġġi ta' guanidine hydrochloride u urea huma kif ġej: guanidine hydrochloride għandu solubilità u trasferibbiltà relattivament qawwija, u jagħmilha inqas probabbli li tikkawża dekorazzjoni ta 'rabta kovalenti ta' proteini rikombinanti { taħt standards ta 'bażi ta' aċidu, u impatt fuq analiżi tal-kromatografija ta 'skambju ta' joni ta 'proteini; L-urea għandha solubilità relattivament fqira, iżda għandha vantaġġi bħal li ma tkunx elettrolit dgħajjef, li hija newtrali, bi prezz baxx, u ma tikkawżax faċilment ħafna proteini li joqgħodu wara li jerġgħu jwaqqfu l-proteini . Fl-esperimenti speċifiċi, ir-riċerkaturi xjentifiċi għandhom jagħżlu bbażati fuq standards u għanijiet biex jiksbu l-aħjar riżultati sperimentali .}}}}}}}}}}}